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星铁:不对!翁星怎么有俩救世主

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第291章 《哀丽秘榭的白默》(重制)
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这章有点没传上来,等一下。审核出问题了。 先随便传点东西顶一顶。 从黄精中单独提取黄酮类物质通常需要结合黄酮的理化性质(如极性、溶解性、酸碱性等)进行分离纯化。以下是具体步骤和注意事项: --- 1.原料预处理 ·干燥与粉碎:将黄精根茎洗净后烘干(50-60避免高温破坏黄酮),粉碎成粗粉(40-60目),增大接触面积。 ·脱脂(可选):若样品脂肪含量高,可用石油醚或正己烷回流脱脂,避免干扰后续提取。 --- 2.黄酮的初步提取 方法选择 ·醇提法(常用): ·溶剂:60-70%乙醇(黄酮苷类)或甲醇(苷元类)。 ·条件:料液比1:10~1:15,60-70回流1-2小时,重复2-3次。 ·优点:兼顾极性与非极性黄酮,适合大多数黄精黄酮(如芹菜素、木犀草素衍生物)。 ·热水提取(针对黄酮苷): ·80-90浸提,但可能溶出多糖等杂质,后续纯化压力大。 ·超声/微波辅助: ·超声(40kHZ,30分钟)或微波(300,5分钟)可提高效率,缩短时间。 浓缩与初步除杂 ·合并提取液,减压浓缩至无醇味,得浸膏。 ·除多糖/蛋白质: ·加入3-4倍体积95%乙醇沉淀多糖,静置后离心取上清。 ·或用Seva法(氯仿:正丁醇=4:1)去除蛋白质。 --- 3.黄酮的纯化 液液萃取法 ·用乙酸乙酯或正丁醇萃取水相中的黄酮(黄酮苷元更易溶于乙酸乙酯,苷类偏向正丁醇)。 ·重复3-4次,合并有机相,减压浓缩。 柱层析法(关键步骤) ·吸附剂选择: ·聚酰胺柱:适合黄酮(氢键吸附),用30%-95%乙醇梯度洗脱(如先水洗去糖,再用50%乙醇洗黄酮)。 ·硅胶柱:对黄酮苷元效果好,洗脱剂用氯仿-甲醇梯度(如10:1→5:1)。 ·大孔树脂(如AB-8、D101):先水洗去糖,再用30-70%乙醇洗脱黄酮。 ·操作要点: ·上样量不超过柱体积的1/10,流速1-2BV/h。 ·分段收集,通过TLC(硅胶G板,展开剂:乙酸乙酯-甲酸-水=8:1:1)或HPLC监测目标成分。 重结晶 ·对纯度较高的部分,可用甲醇-水或乙醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶。 --- 4.鉴定与验证 ·显色反应: ·盐酸-镁粉反应(橙红色)、AlCl3反应(黄色荧光)初步确认黄酮。 ·HPLC/MS: ·对照品比对(如芦丁、槲皮素等),或通过质谱分析分子量及结构。 ·UV光谱:黄酮类在250-280nBandII)、330-380nBandI)有特征吸收。 --- 注意事项 1.避免氧化:提取过程避光、氮气保护,尤其对含酚羟基的黄酮。 2.梯度优化:柱层析时需预试验确定最佳洗脱比例。 3.得率与纯度平衡:高纯度可能损失得率,需根据需求调整(如药用需≥95%)。 4.中试放大:若工业化生产,需优化溶剂回收、树脂再生等成本问题。 --- 示例流程(简化版) 黄精粉→70%乙醇回流→浓缩→AB-8树脂(水洗→50%乙醇洗)→浓缩洗脱液→聚酰胺柱(水→30%乙醇)→冷冻干燥→黄酮组分(纯度可达80%以上)。 通过上述方法可高效分离黄精黄酮,后续可结合制备型HPLC或结晶进一步提高纯度。
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